脂肪测定仪--粮油检验 植物油脂中缩水甘油脂肪酸酯的测定1

（）工作简况

　　1任务来源及起草单位

　　根据粮食局2017年第二批粮油行业标准制修订计划的要求，由粮食和物资储备局科学研究院负责《粮油检验 植物油脂中缩水甘油脂肪酸酯的测定》制定工作。起草单位成立的标准起草组负责进行本标准的各项工作。

　　2 制定本标准的意义

　　缩水甘油脂肪酸酯，简称缩水甘油酯，是缩水甘油和脂肪酸的酯化产物。2008年， 德国联邦风险评估所证实了精炼食用油中存在着大量的缩水甘油酯。缩水甘油酯在体内可代谢生成缩水甘油。缩水甘油具有基因毒性，啮齿动物口服摄入后可在不同组织内引发肿liu形成，ai症研究机构将其分类为2A类致癌物，即“对人类很可能有致癌性”。缩水甘油酯已成为种潜在的精炼植物油污染物。

　　但是，目前我国还没有植物油脂中缩水甘油脂肪酸酯测定的相关标准，因此，为进行严格的食用植物油质量监督和保障消费者的食品安全，有必要在我国建立食用植物油中缩水甘油脂肪酸酯的标准检测方法，为我国植物油加工和消费以及“中国好粮油行动计划”提供技术支持。

　　3 标准主要工作过程

　　为了更好的完成标准任务，查阅了国内外相关资料，在美国油脂化学家学会（AOCS）推荐标准Joint AOCS/JOCS Official Method Cd28-10《Glycidyl fatty acid esters in edible oils》、AOCS Official Method 29a-13《2- and 3-MCPD fattyacid esters and glycidol fatty acid esters in edible oils and fats by acid transesterification》、AOCS Official Method 29b-13《Determination ofbound monochloropropanediol- (MCPD-) and bound 2,3-epoxy-1-propanol (glycidol-)by gas chromatography/mass spectrometry (GC/MS)》、AOCSOfficial Method 29c-13《Fatty-acid-bound3-chloropropane-1,2-diol(3-MCPD)and2,3-epoxi-propane-1-ol (glycidol) determination in oils and fats by GC/MS(Differential Measurement)》和德国油脂学会（DGF）推荐标准DGF C-VI 18 (10)《Fatty-acid-bound 3-chloropropane-1,2-diol(3-MCPD)and2,3-epoxipropane-1-ol(glycidol)determinationin oils and fats by GC/MS (Differential Measurement)》的基础上，确定了本方法标准制定方案和工作计划。

　　（二）标准的编制原则和标准的主要内容

　　1 标准编制原则

　　本标准是根据GB/T1.1-2009《标准化工作导则第1部分：标准的结构与编写规则》、GB/T 20000.2-2009《标准化工作指南第2部分：采用标准的规则》、GB/T20001.4-2009《标准编写规则第4部分：化学分析方法》的规定进行编制的。

　　2 确定标准主要内容

　　本标准的技术内容包括范围、规范性引用文件、原理、试剂和材料、仪器和设备、试样制备、分析步骤、结果计算及精密度等。

　　3 主要研究内容及试验结果综述

　　3.1 标准研究的内容及原理

　　本标准规定了植物油脂中缩水甘油脂肪酸酯测定的原理、试剂和材料、仪器和设备、试样制备、分析步骤、结果计算和精密度。

　　液相色谱-质谱法测定原理为：植物油脂中的缩水甘油脂肪酸酯经固相萃取柱净化、富集后，用液相色谱-质谱分析，外标法定量。

　　气相色谱-质谱法测定原理为：植物油脂中缩水甘油脂肪酸酯在溴化钠的酸性水溶液中转化为3-溴代丙二醇（3-MBPD）单酯。在酸性甲醇溶液中，3-MBPD单酯转化为游离3-MBPD，3-MBPD用苯基硼酸衍生后进行气相色谱-质谱分析。终以缩水甘油含量评价植物油脂中缩水甘油脂肪酸酯的含量，内标法定量。

　　3.2 液相色谱-质谱法

　　3.2.1 样品提取

　　准确称取1g植物油（至0.01g）于玻璃烧杯中，加入6mL甲基叔丁基醚/乙酸乙酯（4:1，v/v）将样品溶解，转移到10mL容量瓶中，并定容摇匀。

　　C18固相萃取柱连续用甲醇清洗柱内壁4次，每次甲醇用量为1mL，用微量注射器注入100μL待测样品溶液，再用甲醇洗脱样品3次，每次甲醇用量为2mL。洗脱液用玻璃管收集，氮气吹干后加入2mL正己烷/乙酸乙酯（95:5，v/v），用旋涡混合仪震荡30s至充分溶解。把玻璃管中的样品溶液转移到用正己烷/乙酸乙酯（95:5，v/v）清洗过4次（每次用量为1mL）的Silica柱上，用6mL正己烷/乙酸乙酯（95:5，v/v）分3次清洗玻璃管并全部转移到Silica柱子上，进行样品的洗脱。洗脱液用氮气吹干，再准确加入1mL甲醇/异丙醇（1:1，v/v）充分溶解样品，转移到进样瓶中待测。